基因扩增仪的基本要素分析
更新时间:2022-11-25 点击次数:1211次
基因扩增仪是一款多功能、多用途的PCR仪,可满足不同PCR反应管、不同孔数及不同类型PCR实验要求。优异的升降温速度、温度控制保证了实验快速、准确,超大屏幕显示和人性化的操作界面使操作更简单易懂。
基因扩增仪的基本要素与DNA复制的基本要素是一致的:
1、DNA模板:待拷贝的DNA称为模板,它可以是双链DNA也可是单链DNA,扩增得到的产物是双链状态的。
2、引物:是DNA复制的先锋,就象结晶过程中的晶核,引导DNA的合成。在PCR扩增中一般使用合成的寡核苷酸作引物。
3、DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶):是DNA复制的动力,在dNTP等底物存在时在引物的引导下沿着模板DNA合成互补的DNA链。
4、缓冲液:提供DNA合成反应所需的pH,离子强度等环境。
5、4种单核苷酸:dNTP,提供DNA合成原料。
它可以在试管里建立反应,经过数小时之后,就能将极微量的目的基因或者某一特定的DNA段扩增数十万倍,乃至千百万倍,而无需通过繁琐费时的基因克隆程序,便可获得足够数量的精确的DNA拷贝,所以有人亦称之为无细胞的分子克隆法。
PCR反应一般设置20~40次循环,每一循环包括高温变性、低温退火、中温延伸三步反应。每一循环的产物作为下一个循环的模板。PCR的扩增效率很高,如果循环次数是30次,那么新生DNA段理论上达到230拷贝(约为109个分子)。扩增时加入的引物利用荧光素进行标记,使引物和荧光探针同时与模板进行特异性结合,扩增结果通过荧光信号采集系统实时采集信号并输送到计算机分析处理系统,实时输出量化结果。