基因扩增仪被广泛应用于分子生物学领域，它可以把DNA序列进行扩增，让科学家更方便地从样本中提取出特定的DNA片段。本文将为你介绍基因扩增仪的使用方法，帮助你更好地掌握这一实验技术。

 

　　1.准备工作

 

　　在使用之前，需要先准备好耗材和实验器材。首先，检查PCR试剂盒是否完好无损、是否过期。其次，检查随机引物（primers）是否正确、完整。同样重要的是，准备好自己需要扩增的DNA模板，保证模板的质量和纯度。

 

　　2.装载PCR反应体系

 

　　裁切好所需长度的特定引物后，需要将引物与PCR试剂盒配制成反应液。按照试剂盒说明书的指导，在离心管中混合PCR混合液。通常情况下，一支PCR反应混合液可扩增20ulPCR反应液。

 

　　3.安装PCR管到该仪器

 

　　将装有PCR反应体系的管放入孔位。根据PCR引物的交联温度，设置好反应程序的温度体系。设定好反应程序后，按照仪器的说明书启动扩增程序。

 

　　4.扩增反应

 

　　通过基因扩增仪可控制反应的时间和温度，通常PCR反应具有3个阶段：变性、退火和延伸阶段。

 

　　（1）变性：将DNA两股分离为单股。

 

　　（2）退火：引物结合到模板上并结束。

 

　　（3）延伸：在DNA聚合酶作用下延长引物序列并产生新的DNA片段。

 

　　通常情况下，反应温度体系如下所示：

 

　　1）变性：95℃，30秒。

 

　　2）退火：恰当引物Tm-5℃~10℃。

 

　　3）延伸：72℃，30秒/每kbp。

 

　　4）重复扩增若干次，一般为20-30次。

 

　　5.离心与收集产物

 

　　反应液往往是浑浊的，需要离心以便去除沉淀。我们可以用凝胶电泳等方法检测扩增结果，并对针对性更强的目的进行后续的实验操作。

 

　　以上就是使用基因扩增仪的步骤，希望这些内容能帮助您更好地完成实验任务。当然，在实践过程中还可能会遇到各种问题，需要耐心解决。